1. 观察不同刺激强度对肌肉收缩的影响,从而掌握阈刺激、阈上刺激和最大刺激等概念。
2. 观察不同刺激频率对肌肉收缩的影响,从而了解强直收缩的机制。
【实验原理】
一条坐骨神经干是由许多兴奋性不同的神经纤维所组成的。保持足够的刺激时间不变,刚好能引起其中兴奋性较高的神经纤维产生兴奋,表现为受这些神经纤维支配的肌纤维发生收缩,此时的刺激强度即为这些神经纤维的阈强度,具有此强度的刺激叫阈刺激。随着刺激强度的不断增加,有较多的神经纤维兴奋,肌肉的收缩反应也相应逐步增大,强度超过阈值的刺激叫阈上刺激。当阈上刺激在增大到某一值时神经中所有纤维均产生兴奋,此时肌肉做最大的收缩。在继续增强刺激强度,肌肉收缩反应不再继续增大。将引起肌肉最大收缩的最小刺激强度的刺激称为最大刺激。不同频率的电脉冲刺激神经时,肌肉会产生不同的收缩反应。若刺激频率较低,每次刺激的时间间隔超过肌肉单次收缩的持续时间,则肌肉的反映应表现为一连串的单收缩;若刺激频率逐渐增加,刺激间隔逐渐缩短,肌肉收缩的反应可以融合,开始表现为不完全强直收缩,以后成为完全强直收缩。
【实验对象】
蟾蜍。
【实验器材】
蛙类解剖手术器材、蛙钉、林格液、铁支架、活动双凹夹或微调固定器、张力换能器、培养皿、ZL-620A一体信息化信号采集处理系统
【方法和步骤】
1. 制备在体或离体坐骨神经腓肠肌标本。
2. 实验装置
(1)采用离体坐骨神经腓肠肌标本时,将肌动器固定在铁架台的微调固定器上,且与换能器平行,并把标本中预留的股骨固定在肌动器上。采用在体坐骨神经腓肠肌标本时,可省略此步骤。
(2)将张力换能器(50g量程)用活动双凹夹或微调固定器固定在支架上,换能器与桌面平行,腓肠肌的跟腱结扎线固定在张力换能器的簧片上,结扎线与桌面垂直。调节微调固定器的上下转钮,使连线不宜太紧或太松,保持有一定的前负荷。
(3)把坐骨神经放在刺激保护电极上,保持神经与刺激电极接触良好。一体信息化信号采集处理系统的刺激输出连接保护电极,启动ZL-620A一体信息化信号采集处理系统。
3. 实验观察
(1)不同刺激强度对腓肠肌收缩的影响
1)点击ZL-620A菜单“实验/常用生理学实验”,选择“刺激强度对骨骼肌收缩的影响”,设置放大器、采样和刺激器参数(表2-2-1),刺激模式也可采用单刺激或主周期刺激,逐步改变刺激幅度。
表2-2-1 ZL-620A放大器、采样和刺激器参数表
采样参数 |
刺激器参数 |
|||
显示方式 |
记录仪 |
刺激模式 |
自动幅度调节 |
|
采样间隔 |
1ms |
主周期 |
2s |
|
X轴显示压缩比 |
50:1 |
波宽 |
2ms |
|
通道 |
通道1 |
通道4 |
初幅度 |
0.2V |
DC/AC |
DC |
记录刺激标记 |
增量 |
0.05V |
处理名称 |
张力 |
刺激标记 |
末幅度 |
2V |
放大倍数 |
50~100 |
5~50 |
脉冲数 |
1 |
Y轴压缩比 |
4:1 |
64:1 |
延时 |
1ms |
2)逐渐增大刺激强度,找出刚能引起肌肉出现微小收缩的刺激强度(阈强度)。继续增强刺激强度,观察肌肉收缩反应是否也相应增大。继续增强刺激强度,直至肌肉收缩曲线不能继续升高为止。找出刚能引起肌肉出现最大收缩的最小刺激强度,即最大刺激强度。
(2)不同频率对腓肠肌收缩的影响
1)点击ZL-620A菜单“实验/常用生理学实验”,选择“刺激频率对骨骼肌收缩的影响”,设置参数(表2-2-2),刺激模式可采用串刺激。
表2-2-2 ZL-620A放大器、采样和刺激器参数表
采样参数 |
刺激器参数 |
|||
显示方式 |
记录仪 |
刺激模式 |
自动幅度调节 |
|
采样间隔 |
1ms |
串长 |
2s |
|
X轴显示压缩比 |
20:1 |
波宽 |
2ms |
|
通道 |
通道1 |
通道4 |
幅度 |
最大刺激强度 |
DC/AC |
DC |
记录刺激标记 |
首频率 |
1Hz |
处理名称 |
张力 |
刺激标记 |
增量 |
5Hz |
放大倍数 |
50~100 |
5~50 |
末频率 |
50Hz |
Y轴压缩比 |
4:1 |
64:1 |
串间隔 |
5d |
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